Ti-plasmid

Den aktuelle version af siden er endnu ikke blevet gennemgået af erfarne bidragydere og kan afvige væsentligt fra den version , der blev gennemgået den 4. november 2021; verifikation kræver 1 redigering .

Ti-plasmid ( eng.  Ti plasmid fra engelsk  tumor inducing  -inducing the formation of tumors) er et plasmid af jordbakterien Agrobacterium tumefaciens , hvormed det forårsager tumorer i planter . Regionen af ​​Ti-plasmidet, kendt som T-DNA (fra engelsk transfer DNA ), kan integreres i plantegenomet og indeholder gener til biosyntese af fytohormoner og opiner , som udløser tumordannelse [1 ] ] .  

Bygning

Ti-plasmidet er et cirkulært dobbeltstrenget DNA - molekyle bestående af 214.233  basepar (bp) og indeholdende 199 gener. Plasmidet indeholder en region på 12 til 22 tusind bp kendt som T-DNA, som kan integreres i plantegenomet. Seks gener lokaliseret i T-DNA - iaaM1, iaaH2, ipt, tml6, 6a, 6b - er ansvarlige for biosyntesen af ​​opiner og nogle phytohormoner, og iaaM, iaaH2 og ipt generne er onkogener . Ekspressionen af ​​disse gener udløser dannelsen af ​​en tumor - en knude på roden af ​​en inficeret plante [1] .

Ud over T-DNA inkluderer Ti-plasmidet vir-regionen repræsenteret af virABCDEFG- operonen [2] . Vir-generne er ansvarlige for udskæring og overførsel af T-DNA til planteceller . VirA - genet koder for en receptor ( histidinkinase ), der reagerer på phenoliske forbindelser såsom acetosyringon , syringaldehyd og apocynin [3] , der frigives fra beskadigede planteceller . virB - genet koder for pili -lignende proteiner , virC -genproduktet binder til sekvensen , der skal overføres, og proteinerne kodet af virD1- og virD2- generne er endonukleaser , der genkender direkte gentagelser i enderne af T-DNA og laver snit i disse regioner med deltagelse af et ekstra virD4-protein [4] . virE -genproduktet medierer selve overførslen af ​​T-DNA ind i plantecellen, og proteinet kodet af virG -genet udløser ekspressionen af ​​vir-generne, efter at det er phosphoryleret af det aktiverede virA-protein [5] [6] .

Ti-plasmidet indeholder også opin-bearbejdningsgener og tra-regionen, som giver konjugativ overførsel af plasmidet mellem to bakterier [7] .

Infektion

Introduktionen af ​​T-DNA i plantegenomet forløber i fire trin:

T-DNA kan kun trænge ind i planten på skadestedet på grund af de specifikke træk ved virA-receptoren beskrevet ovenfor. Derudover påvirkes indtrængningen af ​​miljøets surhedsgrad og temperatur . Indtrængning af T-DNA medieres af specielle T-bunker, som er placeret i form af et bundt af tynde fleksible fibriller ved en af ​​bakteriecellens poler. Udskæringen og integrationen af ​​T-DNA i plantegenomet medieres af vir-genernes produkter. Processen med at overføre T-DNA til cytoplasmaet i en bakteriecelle tager 30 minutter, og bakterien selv kommer ikke ind i plantecellen, men er placeret i det intercellulære rum og bruger inficerede T-DNA-celler som leverandør af opiner, som tjener som kilde til kulstof og nitrogen for bakterien. Induktionen af ​​virulensgenekspression involverer også specifikke intracellulære plantemetabolitter dannet under sårskader [8] .

Ansøgninger i genteknologi

Agrobacterium tumefaciens bruges aktivt i genteknologi til at skabe transgene planter på grund af dets evne til at transformere planteceller, og det nødvendige gen leveres til plantegenomet som en del af T-DNA [9] .

Noter

  1. 1 2 Gigani, 2017 , s. 91-92.
  2. Stachel SE , Nester EW Den genetiske og transkriptionelle organisation af vir-regionen af ​​A6 Ti-plasmidet af Agrobacterium tumefaciens.  (engelsk)  // The EMBO Journal. - 1986. - Juli ( bind 5 , nr. 7 ). - S. 1445-1454 . — PMID 3017694 .
  3. Lohrke SM , Yang H. , Jin S. Reconstitution of Acetosyringone-Mediated Agrobacterium tumefaciens Virulence Gene Expression in the Heterologous Host Escherichia coli  //  Journal of Bacteriology. - 2001. - 15. juni ( bind 183 , nr. 12 ). - P. 3704-3711 . — ISSN 0021-9193 . - doi : 10.1128/JB.183.12.3704-3711.2001 .
  4. Hamilton CM , Lee H. , Li PL , Cook DM , Piper KR , von Bodman SB , Lanka E. , Ream W. , Farrand SK . pTiC58.  (engelsk)  // Journal Of Bacteriology. - 2000. - Marts ( bd. 182 , nr. 6 ). - S. 1541-1548 . — PMID 10692358 .
  5. Schrammeijer B. , Beijersbergen A. , Idler KB , Melchers LS , Thompson DV , Hooykaas PJ Sekvensanalyse af vir-regionen fra Agrobacterium tumefaciens octopine Ti-plasmid pTi15955.  (engelsk)  // Journal Of Experimental Botany. - 2000. - Juni ( bind 51 , nr. 347 ). - S. 1167-1169 . — PMID 10948245 .
  6. Alexander N. Glazer, Hiroshi Nikaidō. Mikrobiel bioteknologi: Grundlæggende for anvendt mikrobiologi  (engelsk) . - Cambridge University Press , 2007. - ISBN 0-521-84210-7 .
  7. 1 2 Gigani, 2017 , s. 92.
  8. Gigani, 2017 , s. 92-93.
  9. Dale & Park, 2004 , s. 241.

Litteratur