Romanovsky-Giemsa farvning
Den aktuelle version af siden er endnu ikke blevet gennemgået af erfarne bidragydere og kan afvige væsentligt fra den version , der blev gennemgået den 15. juli 2019; checks kræver 2 redigeringer .Romanovsky - Giemsa - farvning er en cytologisk metode til farvning af mikroorganismer , cellestrukturer og væv af forskellige typer (inklusive blod ) til undersøgelse ved lysmikroskopi . Foreslået i 1904 [1] af Gustav Giemsa . I forfatterens version er navnet på farvestoffet "Giemsasche Lösung für die Romanowsky Färbung" (Giemsa-opløsning til farvning ifølge Romanovsky) [2] . Det pletter acidofile formationer i forskellige nuancer af rød, basofile formationer i farver fra lilla til blå.
Forberedelse af farvestoffet
Før pletterne plettes, fortyndes det færdige flydende farvestof med en hastighed på 1-2 dråber af farvestoffet pr. 1 ml destilleret vand. Udstrygningerne farves i 20-25 minutter ved 37°C i et fugtigt kammer (lukket petriskål med et fugtet filter i bunden). Efter farvning vaskes udstrygningerne i rindende vand, tørres i luft og undersøges ved olienedsænkning.
Romanovsky-Giemsa farveblandingen, som er baseret på Romanovsky-Wright malingen , i form af et pulver (kommercielt farvestof) opløses i en blanding af lige store volumener methylalkohol og glycerin (800 mg farvestof pr. 100 ml opløsningsmiddel ). ). Farvestoffet opløses dårligt, så det er bedre at male det med et opløsningsmiddel i en mængde på 300 mg pr. 100 ml, og derefter under omrøring tilsættes farvestoffet, indtil den ønskede koncentration er opnået. Forberedelsen af farvestoffet tager ofte flere dage. Det er vigtigt at bruge kemisk ren methylalkohol og glycerin som opløsningsmidler, da urenheder nedbryder farvestoffets egenskaber. I stedet for methylalkohol kan 100% ethylalkohol bruges. Den tilberedte farveblanding opbevares på et køligt tørt sted i en tæt lukket beholder.
Giemsa speciel standardløsning
- Farvesammensætning:
Farvningsteknik
- Udstrygninger fikseret i methylalkohol farves med en opløsning (1 ml af den færdige flydende maling + 2 ml af den grundlæggende bufferopløsning + 47 ml destilleret vand) i 40-120 minutter (farvningens varighed vælges empirisk). Fosfatbuffer bruges, men bufferens pH afhænger af typen af udstrygning: for en knoglemarvsudstrygning - 5,8-6,0, for en blodudstrygning - 6,4-6,5, til påvisning af protozoer - 6,8, malariaplasmodium - 7, 0-7,2.
- Skyl i destilleret vand, tør og undersøg ved nedsænkning.
Farvelægningsresultat
Bakterier farves lilla-røde, cellecytoplasma blå, kerner røde. Ved farvning af protozoer bliver deres cytoplasma blå, og kernerne bliver rødviolette.
Resultater af farvning af blodudstrygning
- cytoplasma af lymfocytter farver blå-blå, deres kerner - i farver fra intens lilla til violet;
- cytoplasmaet af monocytter er farvet i en uklar blågrå farve, deres kerner - i en lysere lilla-rød, delikat azurofil granularitet;
- granulat af basofiler er farvet i en intens blå-violet farve;
- granulat af eosinofiler farve orange-pink;
- granulat af neutrofiler er farvet i farver fra lilla til violet;
- kernerne af leukocytter er lilla-røde med en tydeligt synlig kromatinstruktur; nukleoler er godt adskilte;
- blodpladegranulomerer farvet røde, hyalomerer farvede blå;
- lyserød farve af hæmoglobin .
Se også
Noter
- ↑ Giemsa G. Eine Vereinfachung und Vervollkommnung meiner Methylenazur-Methylenblau-Eosin-Färbemethode zur Erzielung der Romanowsky-Nochtschen Chromatinfärbung. (tysk) // Centralbl f Bakt etc: magazin. - 1904. - Bd. 37 . - S. 308-311 .
- ↑ Bezrukov A. V. Farvelægning ifølge Romanovsky: om spørgsmålet om prioritet / På 120-årsdagen for opdagelsen af Romanovsky-effekten. - 12 sek. (utilgængeligt link)
 Ordbøger og encyklopædier |
|
|---|