Immunoassay

En immunoassay-metode (immunokemisk assay)  er en biokemisk test, der måler tilstedeværelsen eller koncentrationen af ​​makromolekyler eller mikromolekyler i en opløsning ved hjælp af et antistof eller antigen.

Molekylet fundet i testen kaldes en analyt og er i mange tilfælde et protein. Det kan dog være af forskellige typer og størrelser, så længe antistoffet bevarer evnen til at genkende og binde et bestemt molekyle.

Analytter i biologiske væsker såsom serum eller urin måles ofte ved hjælp af denne metode til medicinske eller forskningsmæssige formål.

Immunoassay-metoden anvendes i forskellige former: den kan udføres i tilfælde af heterogene (eller separative) test med flere trin, ved at tilføje og vaske reagenser eller adskille dem i forskellige trin, eller, i tilfælde af homogene (ikke-separative) ) tests ved at blande prøven med reagenser og foretage en fysisk måling.

Princip

Immunoassay er afhængig af et antistofs evne til at genkende og binde et specifikt makromolekyle, som kan være en kompleks blanding af makromolekyler. I immunologi kaldes det specifikke makromolekyle, der er bundet af et antistof, et antigen , og området på et antigen, som et antistof binder til, kaldes en epitop.

I nogle tilfælde kan et antigen anvendes i et immunoassay til at påvise antistoffer i opløsning, der genkender dette antigen. Med andre ord, i nogle immunoassays kan analytten være et antistof snarere end et antigen.

Ud over bindingen af ​​et antistof til dets antigen, er et andet nøgletræk ved alle immunoassays måden, hvorpå et målbart signal opnås som reaktion på binding. De fleste, men ikke alle, immunoassays involverer kemisk binding af antistoffer eller antigener til en eller anden påviselig markør. I moderne immunoassays er der et stort antal mærker, og de giver dig mulighed for at detektere dem på forskellige måder. Mange mærker kan påvises, fordi de enten udsender stråling eller forårsager en farveændring i opløsningen, fluorescerer, når de udsættes for lys, eller kan udsende lys.

Noter

• Berson SA, Yalow RS, Bauman A., Rothschild MA og Newerly K., Insulin-I131 metabolisme hos mennesker: demonstration af insulinbindende globulin i kredsløbet af insulinbehandlede personer, Journal of Clinical Investigation, vol. 35, nr. 2, 170-190 (1956)
• Yalow RS og Berson SA, Immunoassay af endogent plasmainsulin hos mennesker, Journal of Clinical Investigation, vol. 39, nr. 7.1157-1175 (1960)
• Yalow RS og Berson SA, Immunoassay of plasma insulin in man, Diabetes, vol. 10, nr. 5, 339-344 (1961)
• Wide L. og Porath J., Radioimmunoassay af proteiner med anvendelse af Sephadex-koblede antistoffer, Biochimica et Biophysica Acta - General Subjects, vol. 130, nr. 1, 257-260 (1966)
• Nakane PK og Pierce GB Jr., Enzym-mærkede antistoffer til lys- og elektronmikroskopisk lokalisering af vævsantigener, Journal of Cell Biology, vol. 33, nr. 2, 307-318 (1967)
• Avrameas S., Kobling af enzymer til proteiner med glutaraldehyd. Anvendelse af konjugaterne til påvisning af antigener og antistoffer, Immunochemistry, vol. 6, nr. 1, 43-52 (1969)
• Engvall E. og Perlmann P., Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Kvantitativt assay af immunoglobulin G, Immunochemistry, vol. 8, nr. 9, 871-874 (1971)
• van Weemen BK og Schuurs AHWM, Immunoassay under anvendelse af antigen-enzymkonjugater, FEBS letters, vol. 15, nr. 3, 232-236 (1971)
• van Weemen BK og Schuurs AHWM, Immunoassay under anvendelse af hapten-enzymkonjugater, FEBS letters, vol. 24, nr. 1, 77-81 (1972)
• Pittman JA Jr., RIA: En historisk note, Clinical Chemistry, vol. 19, nr. 7, 793 (1973)
• van Weemen BK og Schuurs AHW M, Immunoassay under anvendelse af antistof-enzymkonjugater, FEBS letters, vol. 43, nr. 2, 215-218 (1974)
• Voller A., ​​Bidwell DE og Engvall E., En mikroplademetode til enzymbundet immunosorbentanalyse og dets anvendelse på malaria, Bulletin of the World Health Organization, vol. 51, nr. 2, 209-211 (1974)
• Voller A., ​​Bidwell DE og Bartlett A., Enzyme immunoassays in diagnostic medicine, Bulletin of the World Health Organization, vol. 53, nr. 1, 55-65 (1976)
• Yalow RS, Citation Classic, Current Contents, 14, 98 (1977)
• Yalow RS, Radioimmunoassay: en sonde til den fine struktur af biologiske systemer, Science, vol. 200, nej. 4347, 1236-1245 (1978)
• Engvall, E., Citation Classic, Current Contents, 12, 16 (1987)
• Voller A. og Bidwell DE, Better health care with microplate ELISA, Citation Classic, Current Contents, 17, 14 (1989)
• Mujumdar RB, Ernst LA, Mujumdar SR og Wagoner AS, Cyaninfarvestofmærkningsreagenser indeholdende isothiocyanatgrupper, Cytometry, vol. 10, nr. 1, 11-19 (1989)
• Yalow RS, Remembrance project: origins of RIA, Endocrinology, vol. 129, nr. 4, 1694-1695 (1991)
• Engvall E., Perspektiv på den historiske note om EIA/ELISA af Dr. RM Lequin, Clinical Chemistry, vol. 51, nr. 12, 2225 (2005)
• van Weemen BK, The rise of EIA/ELISA, Clinical Chemistry, vol. 51, nr. 12, 2226 (2005)
• Lequin RM, Enzyme Immunoassay (EIA)/Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), Clinical Chemistry, vol. 51, nr. 12, 2415-2418 (2005)
• Avrameas S., Historisk baggrund for opfindelsen af ​​EIA og ELISA, Clinical Chemistry, vol. 52, nr. 7, 1430-1431 (2006)
• Hammarström S., Berzins K., Biberfeld P., Engvall E., Hammarström M.-L., Holm G., Troye-Blomberg M. og Wahlgren M., Peter Perlmann 1919-2005, Scandinavian Journal of Immunology, vol. 63, nr. 6, 487-489 (2006)

Noter