5-brom-4-chlor-3-indoyl-beta-D-galactopyranosid | |
---|---|
Generel | |
Systematisk navn |
5-brom-4-chlor-3-indoyl-beta-D-galactopyranosid |
Chem. formel | C14H15BrClNO6 _ _ _ _ _ |
Fysiske egenskaber | |
Molar masse | 408,629 g/ mol |
Klassifikation | |
Reg. CAS nummer | 7240-90-6 |
PubChem | 65181 |
Reg. EINECS nummer | 230-640-8 |
SMIL | C1=CC(=C(C2=C1NC=C2O[C@H]3[C@H]([C@H]([C@H]([C@H](O3)CO)O)O )O)Cl)Br |
InChI | InChI=1S/C14H15BrClNO6/c15-5-1-2-6-9(10(5)16)7(3-17-6)22-14-13(21)12(20)11(19)8( 4-18)23-14/h1-3,8,11-14,17-21H,4H2/t8-,11+,12+,13-,14-/m1/s1OPIFSICVWOWJMJ-AEOCFKNESA-N |
CHEBI | 75055 |
ChemSpider | 58680 |
Data er baseret på standardbetingelser (25 °C, 100 kPa), medmindre andet er angivet. | |
Mediefiler på Wikimedia Commons |
X-gal (også BCIG fra engelsk bromo-chlor-indolyl-galactopyranoside ) er en organisk forbindelse bestående af galactose kombineret med indol . Det er meget udbredt som et substrat for beta-galactosidaser i genteknologi og molekylærbiologi .
X-gal bruges i genkloning til at bestemme cellulær ekspression af β-galactosidase- enzymet kodet i lacZ -genet .
X-gal spaltes af β-galactosidaser til dannelse af galactose og 5-brom-4-chlor-3-hydroxyindol. Sidstnævnte oxideres til 5,5'-dibrom-4,4'-dichlor-indigo, et uopløseligt farvet produkt. X-gal tilsættes til en petriskål eller kulturkolbe sammen med en β-galactosidase-inducer, såsom IPTG .
X-gal giver dig mulighed for visuelt at bestemme, hvilke E. coli -kolonier der er blevet transformeret med den ønskede vektor. Normalt syntetiseres enzymet kodet af lacZ-genet i E. coli-celler under påvirkning af IPTG-induceren, og blå farvning går tabt i celler, der indeholder en genetisk manipuleret konstruktion, hvori lacZ-genet er forstyrret som følge af en genetisk indskud.
lacZ - genet kan bruges som reporter, når bakterier eller gær dyrkes på et medium indeholdende X-gal. Når målgenpromotoren er koblet til den kodende del af galactosidasegenet, resulterer binding af aktivatorproteinet til promotoren i dannelsen af et farvet X-gal-spaltningsprodukt. [en]
X-Gal bruges til at påvise E. coli og relaterede bakterier i vandprøver.