Chetverin, Alexander Borisovich
Alexander Borisovich Chetverin (født 20. maj 1953 ) er en russisk molekylærbiolog , doktor i biologiske videnskaber siden 1995 , professor i molekylærbiologi, tilsvarende medlem af det russiske videnskabsakademi i sektionen fysisk og kemisk biologi siden 30. maj 1997 , leder af laboratoriet for viral RNA- biokemi i Institute of Protein RAS siden 1998 , elev af akademiker Spirin A.S.
Videnskabelig aktivitet
Chetverin arbejdede inden for genteknologi (oprettelse af en ny type vektorer til kloning af matrix-ribonukleinsyre - mRNA ).
I 1991 , på Institute of Protein RAS, opfandt Chetverin og hans kolleger den molekylære kolonimetode , hvis essens er, at når de passende betingelser skabes, multipliceres RNA eller DNA i et gellag , på grund af hvilket afkommet af hver molekyle danner en koloni og spredes ikke gennem reaktionsvolumenet. Da gelmatrixen forhindrer konvektion af væsken indeholdt i den og begrænser diffusionen af nukleinsyrer, spredes formeringsprodukterne ikke i reaktionsmediet, men danner mere eller mindre kompakte molekylære kolonier, som kolonier af bakterier , der vokser på overfladen af næringsstoffer. agar. Hvis formering udføres i et tyndt lag gel, dannes et todimensionalt mønster af kolonier, som hver repræsenterer adskillige kopier ( kloner ) af et originalt RNA- eller DNA-molekyle.
Metoden med molekylære kolonier gjorde det muligt at fastslå kilden til skabeloner i den såkaldte "skabelonløse" RNA-syntese udført af Qβ-replikase (RNA-afhængig RNA-polymerase af bakteriofag Qβ [1] ) i et cellefrit system, samt at studere in vitro ekstremt sjældne rekombinationsreaktioner mellem RNA-molekyler, hvilket førte til opdagelsen af RNA-molekylers evne til spontant at omarrangere deres nukleotidsekvenser under fysiologiske forhold . Disse eksperimenter giver indirekte beviser til fordel for RNA-verdenshypotesen .
Chetverins laboratorium har også udviklet en række praktiske anvendelser af den molekylære kolonimetode, herunder ekstracellulær kloning og genscreening , samt digital diagnostik, som giver pålidelig påvisning af et DNA-molekyle og to RNA-molekyler i 100 µl fuldblod , hvilket tillader til ultrafølsom diagnostik af virale og onkologiske sygdomme .
Priser og præmier
I 1995 blev Chetverin A.B. blev vinderen af A. N. Belozersky -prisen for en række værker om skabelsen af et cellefrit system til replikation, ekspression og kloning af RNA.
Publikationer
Chetverin A.B. er medforfatter til følgende publikationer:
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 2002. Nøjagtig diagnose med molekylære kolonier. Molekylær. biologi. 36.
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 2003. Overvindelse af problemerne med PCR-diagnostik ved hjælp af metoden med molekylære kolonier. Molekylær. medicinen. 2.
- Chetverina E.V., Chetverin A.B. 2008. Nanokolonier: opdagelse, kloning og analyse af individuelle molekyler. Succes biol. kemi. 48.
- Chetverin AB, Chetverina HV 2008. Molekylær koloniteknik: et nyt værktøj til biomedicinsk forskning og klinisk praksis. Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol. 82.
- Chetverin AB, Chetverina HV, Munishkin AV Om beskaffenheden af spontan RNA-syntese ved Qb-replikase // J. Mol. Biol. 1991. V. 222. S. 3-9.
- Chetverina HV, Chetverin AB Kloning af RNA-molekyler in vitro // Nukleinsyreforskning. 1993. V. 21. P. 2349-2353. [2] PMID 7685078 .
- Chetverina HV, Demidenko A.A., Ugarov VI, Chetverin AB Spontane omlejringer i RNA-sekvenser // FEBS-bogstaver. 1999. V. 450. S. 89-94.
- Munishkin AV, Voronin LA, Ugarov VI, Bondareva LA, Chetverina HV og Chetverin AB Effektive skabeloner for Qb-replikase dannes ved rekombination fra heterologe sekvenser. - J. Mol. Biol., 1991, v. 221, s. 463-472.
- Morozov I.Yu., Ugarov VI, Chetverin AB og Spirin AS Synergisme i replikation og translation af messenger-RNA i et cellefrit system. - Proc. Natl. Acad. sci. USA, 1993, v. 90, s. 9325-9329.
- Chetverin AB og Kramer FR Oligonukleotid-arrays: Nye koncepter og muligheder. - Bio/Technology, 1994, v. 12, s. 1093-1099.
- Chetverin AB og Spirin AS Replikerbare RNA-vektorer: Udsigter til cellefri genamplifikation, ekspression og kloning. - Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol., 1995, v. 51, s. 225-270.
- Chetverin AB, Chetverina HV, Demidenko AA og Ugarov VI Ikke-homolog RNA-rekombination i et cellefrit system: bevis for en transesterificeringsmekanisme styret af sekundær struktur. – Cell, 1997, v. 88, s. 503-513.
- Chetverin AB og Chetverina HV Metode til amplifikation af nukleinsyrer i faste medier. US patent 5, 1997, v. 616, s. 478.
- Chetverin AB Puslespillet om RNA-rekombination. FEBS Lett., 1999, v. 460, s. 1-5.
- Gmyl AP, Belousov EV, Maslova SV, Khitrina EV, Chetverin AB og Agol VI Ikke -replikativ RNA-rekombination i poliovirus. - J. Virol., 1999, v. 73, s. 8958-8965.
- Vasilyev NN, Kutlubaeva ZS, Ugarov VI, Chetverina HV, Chetverin AB Ribosomalt protein S1 fungerer som en termineringsfaktor i RNA-syntese af Qβ-fag-replikase. - Nat. Communi., 2013, v. 4, artikelnummer 1781.
Patenter
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 1995. En fremgangsmåde til opformering af nukleinsyrer, en fremgangsmåde til deres ekspression og et medium til deres implementering. RF patent nr. 2048522.
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 1998. En metode til kloning af nukleinsyrer. RF patent nr. 2114175.
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 1998. En metode til diagnosticering af nukleinsyrer. RF patent nr. 2114915.
- Chetverin AB, Chetverina HV 1997. Metode til amplifikation af nukleinsyrer i faste medier. US patent 5.616.478.
- Chetverin AB, Chetverina HV 1999. Metode til amplifikation af nukleinsyrer i faste medier og dens anvendelse til nukleinsyrekloning og diagnostik. US patent 5.958.698.
- Chetverin AB, Chetverina HV 1999. Fast medium til amplifikation og ekspression af nukleinsyrer som kolonier. US patent 6.001.568.
Kilder