Isotachoforese

Isotachoforese (ITP) er en metode til at adskille forskellige typer ioner baseret på deres mobilitet i et elektrisk felt . Med ITF migrerer alle typer ioner i samme retning og danner et sæt af zoner, der er i en ligevægtstilstand og bevæger sig med samme hastighed.

Metodens teoretiske grundlag

ITF-metoden er baseret på et system bestående af tre forskellige elektrolytter , forenet af en fælles modion:

Hvis en elektrisk strøm ledes gennem dette system , vil anionerne blive arrangeret i serie i overensstemmelse med deres elektroforetiske mobilitet, der fører i anodeområdet , lukker i katodeområdet , resten mellem dem i form af smalle zoner med klar koncentration grænser. Bredden af ​​de enkelte zoner ved slutningen af ​​processen svarer til den absolutte mængde af en eller anden anion i blandingen .

Da de enkelte zoner er arrangeret i serier. de er praktisk talt i kontakt, derfor indføres en buffer indeholdende en anion med mellemliggende mobilitet i testprøven , hvis zone vil blive integreret i den resulterende sekvens og skubbe zonerne af anionerne under undersøgelse . Disse hjælpezoner kaldes spacere-separatorer, hvis funktioner udføres af bæreramfolytter, der anvendes i IEF -metoden . Et træk ved ITF-metoden er, at processen ledsages af koncentrationen af ​​zoner, hvis virkning fører til en opløsning, der kan sammenlignes med og endda overlegen adskillelse ved IEF- metoden . Resultaterne af adskillelsen af ​​blandinger ved ITF-metoden optages på optagerbåndet i form af en graf over målingen af ​​tre parametre:

Instrumenter til isotachoforese

Analytisk isotachoforese udføres i en kapillaranordning til isotachoforese, i en teflonkapillær med en indre diameter på 0,5 mm.

Præparativ isotachoforese udføres i en polyacrylamidgelkolonne .

Anvendelse af isotachoforese

  1. Analytisk separation i høj opløsning (μg) af peptider , proteiner , nukleotider , organiske syrer , metalioner (delvis isotoper ).
  2. Præparativ adskillelse af proteiner (d).
  3. Akkumulering i form af en snæver zone af spormængder af stoffer (µg) fra store prøvevolumener på grund af virkningen af ​​koncentration.
  4. Bestemmelse af elektroforetisk mobilitet.

Litteratur

K. Geckeler, H. Eckstein. Analytiske og præparative laboratoriemetoder: Ref. udg.: Perev. med ham. — M.: Kemi, 1994. — 416 s. syg.

Se også