Bradford metode

Bradford-metoden  er en af ​​de kolorimetriske metoder til kvantitativ bestemmelse af proteiner i opløsning. Foreslået af biokemikeren Marion M. Bradford i 1976 .  [1] [2] M. Bradfords artikel i tidsskriftet Analytical Biochemistry , om metoden til kvantitativ bestemmelse af protein i opløsning, er en af ​​de mest citerede videnskabelige artikler i verden.

Princip

Metoden er baseret på Coomassie Brilliant Blue G-250 farvestoffets reaktion med arginin og hydrofobe aminosyrerester . Den bundne form er blå med et absorptionsmaksimum ved 595 nm. Således er stigningen i lysabsorption af opløsningen ved en bølgelængde på 595 nm proportional med mængden af ​​protein i opløsningen. [3]

Metoden giver en god værdi af proteinkoncentration i området fra 2 µg/ml til 120 µg/ml (inden for disse grænser observeres en lineær afhængighed af stigningen i absorption af koncentration, generelt afhænger metodens følsomhed bl.a. forholdet mellem koncentrationerne af proteinet, der skal bestemmes, og farvestoffet: jo mere farvestof, jo mere følsom metode), mindre "pudselig" sammenlignet med Lowry-metoden .

Andre metoder

Noter

  1. Bradford, MM ( 1976 ) En hurtig og følsom metode til kvantificering af mikrogrammængder af protein under anvendelse af princippet om protein-farvebinding . Anal. Biochem. 72 :248-254.
  2. Marion Bradford revolutionerede forskningen . Hentet 18. maj 2021. Arkiveret fra originalen 18. maj 2021.
  3. Knorre D. G., Myzina S. D. Biologisk kemi. - 3. - Moskva: Higher School, 2000. - 479 s. - 7000 eksemplarer.  — ISBN 5060037207 .

Links