Bovint serumalbumin

Bovint serumalbumin (forkortet som BSA , eng.  Bovine Serum Albumin, BSA ) er et bovint plasmaprotein med en molekylvægt på 69.000 Da , enkeltstrenget, bestående af 607 aminosyrerester .

Struktur og egenskaber

Bovint serumalbumin (BSA) er det mest undersøgte og mest udbredte blodprotein (70 % af den samlede proteinsammensætning). Dets plasmakoncentration er 35-55 mg/ml.

Bovint serumalbumin er en kugle i form af en oblat omdrejningsellipsoide med halvakser 17 gange 42 ångstrøm, bestående af 607 aminosyrerester, deres liste og antal er vist i tabellen:

BSA har en ret kompleks rumlig struktur, der danner tre domæner, som hver igen er opdelt i to underdomæner (AB og C). Hvert underdomæne kan opdeles i 3 helixer X, Y og Z. Den sekundære struktur af BSA består ifølge (1H NMR) data af 50-68% alfa-helixer, 16-18% betafolds. Den tertiære struktur er dannet af disulfidbindinger, hvoraf der er 17 stykker i BSA-molekylet (i henhold til antallet af cystein-aminosyrerester). Molekylvægt af BSA = ~69 kDa.

Det er en bekvem model til at studere egenskaberne af kugleformede proteiner.

Ansøgninger i laboratoriepraksis

På grund af tilgængeligheden af ​​udgangsmateriale, stabile isoleringsprocedurer og, som et resultat, relativt lav pris og velkendte egenskaber, er bovint serumalbumin meget udbredt i laboratoriepraksis.

BSA anvendes som standard i forskellige metoder til kvantitativ bestemmelse af proteiner, som standard for proteiners molekylvægt (markør) ved gelkromatografi og proteinelektroforese i denatureret tilstand ( SDS-PAGE ), og også som standardantigen . ved bestemmelse af ændringer i immunresponset under påvirkning af immunmodulatorer eller andre faktorer. Det bruges også til at stabilisere visse enzymer, især restriktionsendonukleaser. Forhindrer vedhæftning af enzymer til karvæggene.

Henter

Primitive måder:

1. "I blodserum (blod uden fibrin) hældes vand i en mængde, der er tyve gange serumvolumenet, derefter udfældes globulinen ved forsigtig tilsætning af eddikesyre. Efter at have ladet væsken bundfælde sig, filtreres den og neutraliseres med sodavand, inddampes ved 40 °, og de fleste af saltene isoleres ved dialyse.
2. ”Til tekniske formål tilberedes den ved at bløde direkte fra dyret i lavvandede zinkkopper med en kapacitet på flere liter. De køler hende ned, indtil hun krøller sig sammen; skal man passe på ikke at ryste det nytappede blod, så stedet hvor operationen udføres bør vælges tæt på dyret. Når blodet er helt størknet, overføres det til de samme skåle med perforeret bund, og blodproppen skæres i små stykker, så serummet kan dræne. Serumet opsamles og inddampes ved moderat temperatur, resten kaldes albumin. Enhver rystning bør undgås, da dette vil sprænge de røde blodlegemer og ødelægge produktets farve. Fem tyre producerer omkring 20 liter serum og omkring 2 kg albumin."

Kilder

• Bovin Albumin Precursor // UniProt Knoledge Base  (utilgængeligt link)