Genpistol

Den aktuelle version af siden er endnu ikke blevet gennemgået af erfarne bidragydere og kan afvige væsentligt fra den version , der blev gennemgået den 7. juli 2019; checks kræver 4 redigeringer .

En  genpistol ( biolistisk partikelleveringssystem ) er en enhed designet til plantetransfektion . Genpistolen leverer tungmetalpartikler belagt med plasmid -DNA. Denne teknologi kaldes ofte bioballistics og biolistics (fra engelsk  bioballistics, biolistics ).

Ved hjælp af en genpistol er det muligt at modificere enhver celletype, inklusive planteceller. I dette tilfælde kan genetisk modifikation af både kernen og organellerne , for eksempel plastider , forekomme .

Enhed

Genpistolen var designet som en luftpistol, der affyrede wolframpartikler . Partiklerne blev coatet med reportergener og modificerede løgceller. Ekspression af reportergenet i løgvæv indikerede vellykket transformation.

Den første genpistol var baseret på sømpistolen . En dråbe wolframpulver med genetisk materiale blev påført en kugle og affyret i en petriskål , foran hvilken der blev anbragt en plade med en udskæring for at stoppe kuglen. Kuglen blev stoppet af en metalplade, og partiklerne af wolfram med genetisk materiale faldt på petriskålen. Cellerne i midten blev fuldstændig ødelagt af metalpartikler, men langs periferien forblev de intakte, og en transformation fandt sted i dem .

I øjeblikket bruges partikler af guld og sølv, da guld ikke er giftigt for celler i sammenligning med wolfram.

Ansøgning

Genkanoner bruges hovedsageligt til at transficere planteceller. Anvendelse på dyreceller er også mulig.

Planter

Målet for genkanoner er ofte callus (udifferentierede planteceller), der vokser på en petriskål. Nogle af cellerne beskadiges ikke væsentligt af metalpartikler; DNA fra overfladen af ​​partiklerne trænger ind i cellekernen og kan integreres i plantekromosomerne .

Udvalgte celler med en indsats behandles med plantehormoner (for eksempel auxiner og gibberelliner ), væv og endda hele planter opnås.

Mennesker og dyr

Genpistoler bruges til at levere DNA-vacciner.

Genkanoner bruges til at mærke celler i vævskulturer. Indførelsen af ​​plasmid-DNA, der koder for fluorescerende proteiner, tillader visualisering af celler i kulturer. [en]

For at transformere C. elegans -ormen bruges genkanoner også som et alternativ til mikroinjektion .

Noter

  1. ↑ Gan W, Grutzendler J, Wong WT, Wong ROL, Lichtman JW, Multicolor DiOlistic Labeling of the Nervous System Using Lipophilic Dye Combinations Neuron Volume 27, Issue 2, 219-225

Litteratur