Victor Efimovich Semenenko | |
---|---|
Fødselsdato | 26. august 1932 |
Fødselssted | Zaporozhye |
Dødsdato | 30. maj 1998 (65 år) |
Et dødssted | Moskva |
Land | USSR → Rusland |
Videnskabelig sfære |
bioteknologi , rumbiologi |
Arbejdsplads | Institut for Plantefysiologi opkaldt efter K. A. Timiryazev RAS |
Alma Mater | Kyiv State University |
Akademisk grad | Doktor i biologiske videnskaber |
Akademisk titel | Professor |
videnskabelig rådgiver | A. A. Nichiporovich |
Præmier og præmier |
K. A. Timiryazev-prisen (1998) |
Victor Efimovich Semenenko (1932-1998) - Doktor i biologiske videnskaber, professor, vicedirektør for Institut for Plantefysiologi opkaldt efter K. A. Timiryazev , leder af afdelingen for intracellulær regulering og bioteknologi for fotoautotrofisk biosyntese.
Viktor Efimovich er almindeligt kendt i Rusland og i udlandet for sit bidrag til problemet med selvregulering af fysiologiske funktioner i planter. Han lagde det grundlæggende grundlag for bioteknologien af fotoautotrofisk biosyntese som en måde at kontrollere det biosyntetiske potentiale af en plantecelle gennem målrettede handlinger på deres reguleringssystemer.
Hans første videnskabelige studenterartikel "Om effekten af lyssult på kloroplasternes tilstand i bladene af grønne planter" [1] , hvor en ung forsker observerede henfaldet og opdelingen af Selagenella kloroplaster, blev publiceret tilbage i 1952. Umiddelbart efter V. E. Semenenko tog sin eksamen fra Kiev Universitet og gik ind på forskerskolen til professor A. A. Nichiporovich ved Institut for Plantefysiologi og for evigt forbundet sin utrættelige videnskabelige aktivitet med navnet på dette institut, idet han opretholdt en vedvarende og dyb interesse for problemerne med fysiologi og biokemi af fotosyntese. Arbejde og kommunikation med A. A. Nichiporovich havde en stærk indflydelse på udviklingen af generelle biologiske synspunkter og dannelsen af Viktor Efimovichs personlighed. Ph.d.-afhandlingen var helliget studiet af induktionsprocesser for fotosyntetisk gasudveksling, hvor fænomenet lysafhængig frigivelse af CO2 blev opdaget for første gang, hvis biokemiske undersøgelse i forskellige laboratorier senere førte til opdagelsen af fotorespiration [2] .
Umiddelbart efter eksamen fra kandidatskolen i 1958, ledede V. E. Semenenko en gruppe i laboratoriet for fotosyntese af IGF, som løste problemerne med at bruge encellede fototrofiske mikroorganismer i lukkede biologiske livsstøttesystemer. Organiseringen af denne gruppe, initieret af A. A. Nichiporovich, blev dikteret af den vellykkede start på rumudforskning i disse år og fremkomsten af en ny gren af viden- rumbiologi .
De store fremskridt inden for rumudforskning i slutningen af 1950'erne og 1960'erne, nu i det sidste århundrede, affødte optimisme og entusiasme i videnskabelige kredse. Allerede før Gagarins flyvning ud i rummet, blev udsigterne til langsigtede interplanetariske rejser, skabelsen af beboelige fremmede stationer og orbitale komplekser, hvor et af hovedleddet var biologiske livsunderstøttende systemer ved hjælp af fotosyntetiske organismer, primært mikroalger, overvejet. En særlig gruppe til undersøgelse af mikroalger blev oprettet ved Institut for Plantefysiologi ved USSR Academy of Sciences og derefter et laboratorium, ledet af V. E. Semenenko. De særlige forhold ved livsstøttesystemer krævede undersøgelse og løsning af en række spørgsmål, som i 2 årtier bestemte retningen for laboratoriets forskning.
Først og fremmest blev levedygtigheden og niveauet af Chlorella -mutationer under rumflyvningsforhold undersøgt, for hvilke der allerede i 1958 blev udført eksperimenter på ubemandede satellitter, som ikke viste nogen mærkbare ændringer i algernes fysiologiske og populationstilstand i flyveeksperimentet [3].
En lige så vigtig fase var undersøgelsen af grønne encellede alger og menneskers forenelighed med deres konstante kontakt. Dette spørgsmål blev løst i begyndelsen af 60'erne i fælles eksperimenter med Institut for Biofysik ved det medicinske videnskabsakademi. Langtidsophold af testerne i en isoleret trykkabine med en fotoreaktor med encellede alger forbundet til gasudvekslingssystemet påvirkede ikke besætningens tilstand og påvirkede ikke mikroalgerne [4-6].
Parallelt med disse værker blev de mest lovende former for encellede alger til livsstøttesystemer udvalgt, deres vækst blev intensiveret, og forskellige typer lukkede fotobioreaktorer blev udviklet. Som et resultat blev der i løbet af et 1,5-måneders kontinuerligt eksperiment opnået en produktivitet af Chlorella på 25-30 liter oxygen fra 1 liter suspension om dagen, plane fotoreaktorer, fotoreaktorer med luftlifte, turbosorbere, med dysesprøjtning af suspensionen i belyst volumen, med fordeling af lysenergi i suspension ved hjælp af forskellige typer lysledere. Fotoreaktoren udviklet i 1967 af V.E. Semenenko til intensiv dyrkning af mikroalger med lysfordeling ved hjælp af lysledere bruges stadig på Institute of Biomedical Problems i forsøg med mennesker i hermetisk lukkede volumener [7].
Den primære betingelse, der afgjorde muligheden for at bruge et biologisk livstøttesystem, var en høj grad af pålidelighed og stabilitet af algeforbindelsen. Teorien om autoselektionsprocesser i mikroalgepopulationer udviklet af V. E. Semenenko og L. N. Tsoglin i 1967, eksperimentelt testet i 1969-1972, udelukkede muligheden for forringelse af forbindelsens gasudvekslingsegenskaber og viste muligheden for kun at forbedre fotosyntese- og produktionsparametrene. af mikroalger i processen deres lange kontinuerlige dyrkning [8,9]. Graden af pålidelighed af den biologiske forbindelse er således bestemt af niveauet af design og tekniske løsninger.
Sammen med regenereringen af atmosfæren omfatter opgaverne i det biologiske livsstøttesystem også at sikre tilstrækkelig ernæring til besætningen. Med et begrænset antal komponenter i den biologiske forbindelse er "tilpasningen" af den biokemiske sammensætning af mikroalger til den menneskelige kost af stor betydning. Spørgsmålene om regulering af den biokemiske orientering af mikroalgecellers fotosyntetiske metabolisme blev et af hovedområderne for forskning af V. E. Semenenko, som senere resulterede i teorien om endogen regulering af fotosyntese foreslået af ham [10]. Arbejdet i denne retning har ført til udvælgelse af former - producenter af forskellige slags forbindelser og udvikling af metoder til at kontrollere den biokemiske sammensætning af mikroalger ved hjælp af en lang række ekstreme påvirkninger på kultur [11, 12]. Metoden til tofasedyrkning af mikroalger, der blev foreslået i 1970'erne, gjorde det muligt at gennemføre processen med kontinuerlig produktion af biomasse med en given kemisk sammensætning uden at reducere mikroalgers fotosyntetiske aktivitet [13, 14].
Moderne bioteknologi af mikroalger var også baseret på værker inden for rumbiologi . Den uomtvistelige fortjeneste heri tilhører V. E. Semenenko. Bredden af videnskabelige interesser karakteristisk for Viktor Efimovich tillod ham at gå ud over praktisk astronautik, og i 1971 blev gruppen omdannet til Laboratory of Molecular Bases of Intracellular Regulation og derefter til Institut for Intracellulær Regulering og Bioteknologi for Fotoautotrofisk Biosyntese.
Fotosyntetiske mikroorganismer i alle disse år var hovedobjektet for forskning af V. E. Semenenko, hvilket gjorde det muligt for ham ikke kun at blive en anerkendt leder inden for eksperimentel og anvendt algologi, men også at yde et stort bidrag til studiet af fysiologi, biokemi og , i de senere år, fotosyntesens genetik. På den ene side er mikroalger en fremragende model til at studere principperne for selvregulering på grund af den ekstremt høje plasticitet af deres stofskifte. På den anden side gjorde studiet af det fysiologiske og biokemiske grundlag for metabolismens plasticitet det muligt at finde måder at kontrollere biosyntesen af mikroalger på og lægge det grundlæggende grundlag for et fundamentalt nyt område inden for bioteknologi, bioteknologien inden for fotoautotrof biosyntese [15 , 16]. For at bruge mikroalger til grundlæggende og anvendt forskning blev der under ledelse af Viktor Efimovich oprettet en samling (genpulje) af mikroalger IPPAS på Institute of M. G. Vladimirova, som er en del af International Association of Collections og i øjeblikket er en af de mest repræsentative europæiske samlinger af mikroalger.
Studierne af V. E. Semenenko, der med succes kombinerede dyb teoretisk forskning med anvendt udvikling, blev tildelt USSR State Prize i 1988 og modtog bred international anerkendelse. Deltagelse med prof. X. Dilov i skabelsen af storskala biomasseproduktion i Bulgarien, ledelse af en række internationale projekter og den europæiske arbejdsgruppe inden for algologi - dette er ikke en komplet liste over hans bidrag til anvendt biologisk videnskab [15,17 ].
Viktor Efimovichs hovedinteresser, som han selv formulerede dem, var rettet mod at studere selvreguleringen af fysiologiske processer og metabolismen af plantefotoautotrofe celler, nemlig:
— at belyse de fysiologiske reaktioner af de genetiske systemer i en plantecelle — at belyse den molekylære og cellulære organisation af mekanismerne for endogen regulering af fotosyntese — at studere metabolismen og cellecyklusserne for udvikling af fotoautotrofe encellede organismer.
På denne vej blev de mest betydningsfulde videnskabelige opdagelser gjort, og et unikt og lysende mærke blev efterladt i indenlandsk videnskab. I en galakse af russiske videnskabsmænd fra det 20. århundrede, der ydede et væsentligt bidrag til studiet af de primære processer af fotosyntese (V. B. Evstigneev, A. A. Krasnovsky), strukturen og biosyntesen af klorofyl (T. N. Godnev, A. A. Shlyk), fotosyntetisk kulstofmetabolisme ( A. T. Mokronosov, N. G. Doman, E. N. Kondratieva, A. K. Romanova), genomet af det fotosyntetiske apparat (N. M. Sisakyan) og den fotosyntetiske produktivitet af cenoser (A. A. Nichiporovich), indtager VE Semenenko en særlig position, hvor han hellige sig selvstudiet af sit arbejde. regulering af fysiologiske processer og plantemetabolisme.
I begyndelsen af 70'erne vendte Viktor Efimovich sig til det gamle problem med plantefysiologi om virkningen af assimilater (eller overfodring af planter) på fotosyntesen for at dechifrere det på molekylært niveau. For at studere eksistensen af metabolitautoregulering af fotosyntese blev der stillet tre hovedspørgsmål: 1) hvad er den mulige natur af denne effektormetabolit, 2) hvad er den molekylære mekanisme for dens virkning i kloroplasten, 3) hvad er konjugationsmekanismen af foto- og metabolitregulering.
For at søge blandt fotosyntesens produkter efter en metabolit, der udfører en regulerende rolle i cellen, blev en original tilgang brugt - brugen af modificerede glukosemolekyler, der har biologisk nytte, men begrænset metabolisme. Disse kriterier blev opfyldt af 2-deoxy-D-glucose (2dDG), som blev brugt til at studere undertrykkelsen af fotosyntese og chloroplastens proteinsyntesesystem. Opdagelsen af lysafhængigheden af den undertrykkende virkning af 2dDH viste yderligere tæt samarbejde mellem processerne for metabolisk regulering og fotoregulering af chloroplastbiosyntese.
Allerede i 1982, i løbet af inhiberende analyse og kronologien af hændelser, der forekommer i kloroplasten, blev det konkluderet, at den regulerende virkning af glucose udføres på niveauet af chloroplast DNA-transkription [22]. Senere blev disse konklusioner fuldt ud bekræftet af eksemplet med transkription af gener, der koder for proteiner i reaktionscentret af fotosystem II . At opnå regulatoriske mutanter af Chlorella vulgaris , som er overproducenter af slutprodukter af fotosyntese, samt mutanter af cyanobakterien Synechocystis sp. PCC 6803, resistent over for 2dDH [40, 41], var en ny moderne tilgang til studiet af metabolisk regulering, som gjorde det muligt at vise involvering af glukose i reguleringen af chloroplastgenomekspression og fotosyntese på genetisk niveau.
Ydermere blev fænomenerne med metabolitregulering af fotosyntese, studeret i modelforsøg under anvendelse af ikke-metaboliserbare glucoseanaloger, observeret i fysiologiske eksperimenter med hypertrofieret ophobning af assimilater i kloroplasten efter at have fyldt puljen af reservepolysaccharider. Det blev vist, at overgangen af fotosyntetiske celler til specialiserede synteser bestemmes af virkningen af en kompleks kæde af genetisk bestemte begivenheder og inkluderer processerne med induceret syntese og selektiv proteinproteolyse. Disse resultater (G. L. Klyachko-Gurvich, T. S. Rudova) dannede grundlaget for udviklingen af kontrol over retningen af mikroalgebiosyntese og produktionen af biomasse af en given sammensætning med et højt indhold af kulhydrater, lipider eller biologisk aktive forbindelser.
I løbet af disse prioriterede undersøgelser, udført af en stor gruppe studerende af V. E. Semenenko (M. V. Zvereva, E. S. Kuptsova, D. A. Los, L. A. Shitova, N. V. Lebedeva) i Moskva (IGF RAS) og i Pushchino (IOPB RAS), glukoses rolle i chloroplasten blev undersøgt, og det blev fundet, at den negative metaboliske regulering af ekspressionen af fotosyntesegener af slutprodukterne af fotosyntetisk kulstofreduktion er en af de vigtigste endogene faktorer, som ved at begrænse chloroplastens funktion, spiller en nøglerolle i adaptive reaktioner af det fotosyntetiske apparat og dets donor-acceptor-interaktioner i cellen. Resultaterne af disse undersøgelser dannede grundlaget for Timiryazev-foredraget leveret af V. E. Semenenko i 1984.
Parallelt med undersøgelsen af endogen regulering af fotosyntese i tilfælde af overdreven aktivitet af fotosyntese i sammenligning med celleanmodninger, var en fremtrædende plads blandt V.E. Semenenkos interesser besat af problemet med manifestation af selvregulering af fotosyntese, når det er begrænset ved mangel på kuldioxid [51-62].
I undersøgelsen af dette problem gik V.E. Semenenko ud fra den hypotese, at den lave koncentration af CO2 i jordens moderne atmosfære er en af de globale faktorer på planetarisk skala, som begrænser fotosyntesen af mikroalger og tilsyneladende af alt C3 planter. I begyndelsen af 1970'erne, efter opdagelsen af C4-fotosyntesen , blev det synspunkt udbredt, at evnen til at koncentrere CO2 i cellen er et særpræg for C4-planter, mens C3-planter ikke har denne evne. På det tidspunkt beskæftigede mange forskere sig med kulstofs skæbne i C3-planter allerede efter dets interaktion med RuBisCO, mens transporten af CO2 ind i cellen i bedste fald blev noteret som en modstand mod CO2-diffusion.
Ikke desto mindre er der en række kendsgerninger som uoverensstemmelsen mellem Rubiscos faktiske affinitet for CO2 og dets beregnede koncentrationer i stromaen, en stigning i fotosyntetisk affinitet for CO2, når celler tilpasser sig et fald i niveauet af kuldioxid i miljøet, mikroalgers evne til at vokse i fravær af CO2 på bicarbonatholdige medier, var i strid med hypotesen om direkte diffusion af CO2 til carboxyleringscentre og viste, at tilvejebringelsen af mørkereaktioner af fotosyntese med et substrat er under genetisk kontrol af celle [33,63,64].
I denne henseende vendte V. E. Semenenko sig i midten af 1970'erne til det grundlæggende problem med at organisere de primære processer for CO2-assimilering, som han tilskrev absorption, transmembranoverførsel og intracellulær akkumulering af uorganisk kulstof (CH) såvel som koncentrationen af CO2 i carboxyleringszoner. Viktor Efimovich begyndte at undersøge dette problem fra studiet af kulsyreanhydrase i mikroalger, idet han mente, at en væsentlig rolle i de primære processer af CH-assimilering kan tilhøre enzymatiske reaktioner, der involverer dette enzym, som praktisk talt ikke blev undersøgt i planter på det tidspunkt [53, 57-59,61].
Allerede i det første arbejde i denne retning, udgivet af ham i 1977, blev ideerne om eksistensen af et kulsyreanhydrasesystem i fotosyntetiske celler, herunder opløselige og membranbundne former af enzymet, for første gang fremsat og eksperimentelt underbygget. . Disse data om eksistensen af en familie af kulsyreanhydraser i mikroalger og tilstedeværelsen af membranenzymer blandt dem overgik væsentligt andre forskeres videnskabelige søgninger [62].
En detaljeret undersøgelse af organiseringen af kulsyreanhydrasesystemet i forskellige taksonomiske grupper af mikroalger, dets fysiologiske og biokemiske egenskaber, regulering af syntesen af forskellige former for kulsyreanhydrase samt adaptive omarrangeringer af deres aktivitet tillod V. E. Semenenko og hans elever allerede i 1981 for at præsentere en model af den originale CO2-koncentrerende mekanisme (SCM) i mikroalger, som startede mange forskeres appel til dette problem59. En stor præstation er opdagelsen af V. E. Semenenko og Z. M. Ramazanov af den regulerende rolle af oxygenasefunktionen af RuBisCO/O i induktionen af CO2-afhængig form for kulsyreanhydrase og i implementeringen af regulatoriske interaktioner mellem fotosyntese, fotorespiration og den nukleare genetik apparat af en plantecelle til auto-optimering af kulstofernæring af mikroalger. I disse værker blev det vist, at glyoxylat, et produkt af fotorespiration, er en inducer af syntesen af kulsyreanhydrase involveret i CH-transport i kloroplasten [55, 59, 65, 66].
Den teoretiske del af arbejdet omfatter en ny hypotese af Viktor Efimovich om den vigtige rolle, som en pyrenoid indeholdende Rubisco/O og kulsyreanhydrase spiller i koncentrationen, genereringen og fikseringen af CO2 i kloroplasten. Studierne af V. E. Semenenko, udført sammen med hans kone og kollega M. G. Vladimirova, hvor lokaliseringen af Rubisco/O i pyrenoider blev vist for første gang, er velkendte blandt specialister, der beskæftiger sig med problemet med kulstofmetabolisme [67-69 ].
Opdagelsen i 1988 af kulsyreanhydrase i thylakoidmembranen og studiet af kinetikken af fotokemiske reaktioner af kloroplasten i nærvær af kulsyreanhydrasehæmmere og i SCM-mutanter viste den direkte involvering af thylakoid kulsyreanhydrase i kontrollen af aktiviteten af Calvin cyklus. Disse data tjente som et seriøst argument til fordel for shunting af SCM, hvis essens er overførslen af HCO3 til lumen og dets omdannelse ved hjælp af kulsyreanhydrase til CO2, som diffunderer ind i stroma langs koncentrationsgradienten [51,52 ,54].
Modellen af denne mekanisme for CO2-koncentration, -generering og -fiksering i kloroplasten i mikroalger, som tager højde for pH-værdien af cellekammer, membranernes selektive egenskaber og den intracellulære lokalisering af CA, RuBisCO og fotosystemer, blev analyseret i særlige anmeldelser og artikler og anerkendt af moderne fotosynteseforskere. Fordelen ved denne model er også, at den inducerer en lang række nye retninger i studiet af fotosyntese, især integrationen af funktionerne af kulsyreanhydrase i fotosyntesen med dens isoformers rolle i respirationsprocesserne, vandfotolyse, og O2-frigivelse, som sikrer symmetrien af de fotosyntetiske og respiratoriske funktioner i kulsyreanhydrasefamilien i planteceller.
De opnåede eksperimentelle data og de generaliseringer, der blev foretaget på grundlag heraf, gjorde det muligt for V. E. Semenenko og kolleger at formulere konceptet om SCM's funktionelle rolle som et integreret integreret system, hvor kompartmentering, selektive egenskaber af membraner, protongradient, lokalisering og topologi af CA og transmembran transport af CH spiller en afgørende rolle. , Dette koncept udvider forståelsen af fotosyntetisk metabolisme.
Liste over publikationer. For at åbne, klik på "vis" knappen til højre