Rekombinase polymerase amplifikation

Recombinase polymerase amplifikation ( engelsk  Recombinase Polymerase Amplification , RPA) er et alternativ til polymerasekædereaktionen . RPA-teknologien sikrer opformering af genetisk materiale på mindre end 15 minutter [1] , og selve reaktionen udføres under isotermiske forhold . Ved at tilsætte revers transkriptase til reaktionsblandingen ved hjælp af RPA er det muligt at påvise RNA såvel som DNA uden behov for en separat cDNA -fremstillingsprocedure . Da reaktionen er isoterm, kan der bruges billigere og enklere udstyr til den, sammenlignet med PCR [2] [3] [4] [5] [6] [7] . Det optimale temperaturområde er 37-42 °C, men reaktionen forløber med lav hastighed og ved stuetemperatur. Denne fordel gør RPA til en fremragende kandidat til udvikling af billige, hurtige, feltbaserede molekylære diagnostiske tests. RPA-teknikken er udviklet af TwistDX LTD, et bioteknologifirma med base i Cambridge, Storbritannien.

Noter

  1. ↑ HURTEST VIL DETTEKER VIRUS-DNA UDEN PCR . chemport.ru (04.02.2015). Hentet 6. oktober 2015. Arkiveret fra originalen 6. oktober 2015.
  2. ↑ Zachary Austin Crannell, Brittany Rohrman, Rebecca Richards-Kortum. Kvantificering af HIV-1 DNA ved hjælp af realtids rekombinasepolymeraseamplifikation  // Analytisk kemi. — 2014-06-17. - T. 86 , nr. 12 . - S. 5615-5619 . — ISSN 0003-2700 . - doi : 10.1021/ac5011298 .
  3. ↑ Liu, L., Wang, J., Geng, Y., Wang, J., Li, R., Shi, R., & Yuan, W. (2018). Udstyrsfri rekombinasepolymerase-amplifikationsassay ved hjælp af kropsvarme til visuel og hurtig point-of-need-detektion af hundeparvovirus 2. Molekylær og cellulære prober, 39, 41-46. PMID 29705183 PMC 7127419 doi : 10.1016/j.mcp.2018.04.004
  4. ↑ Qin, Z., Xue, L., Cai, W., Gao, J., Jiang, Y., Yang, J., ... & Wu, Q. (2021). Udvikling af et rekombinasestøttet amplifikationsassay til hurtig påvisning af humant norovirus GII. 4. BMC Infectious Diseases, 21(1), 1-8. PMID 33750333 PMC 7941963 doi : 10.1186/s12879-021-05942-x
  5. ↑ Zhang, W., Feng, Y., Zhao, H., Yan, C., Feng, J., Gan, L., ... & Yuan, J. (2021). Et rekombinasestøttet amplifikationsassay til hurtig detektion af Klebsiella pneumoniae Carbapenemase-genet og dets karakteristika i Klebsiella pneumoniae. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology, 869. PMID 34616692 PMC 8488121 doi : 10.3389/fcimb.2021.746325
  6. ↑ Feng, Y., Xue, G., Feng, J., Yan, C., Cui, J., Gan, L., ... & Yuan, J. (2021). Hurtig detektion af New Delhi Metallo-β-Lactamase-gen ved hjælp af rekombinase-støttet amplifikation direkte på kliniske prøver fra børn. Frontiers in microbiology, 2087. PMID 34367092 PMC 8339468 doi : 10.3389/fmicb.2021.691289
  7. ↑ Li, F., He, P., Xiong, D., Lou, Y., Pu, Q., Zhang, H., ... & Yu, J. (2021). En rekombinasestøttet amplifikationsmetode til omvendt transkription til hurtig og point-of-care-detektion af SARS-CoV-2, inklusive varianter. Virus, 13(9), 1875. PMID 34578456 PMC 8472806 doi : 10.3390/v13091875