Ionbytterkromatografi er et særligt tilfælde af ionkromatografi , der giver dig mulighed for at adskille ioner og polære molekyler baseret på ladningerne af de molekyler , der adskilles .
Denne type kromatografi giver dig mulighed for at adskille næsten alle ladede molekyler, herunder: store proteiner , små molekyler af nukleotider og aminosyrer . Ofte bruges ionbytterkromatografi som den første fase af proteinoprensning .
Til ionbytterkromatografi anvendes syntetiske polymerer, oftest baseret på polystyren og polyphenoler. De grupper, der er ansvarlige for ionbytningsprocesser, indføres oftest som substituenter i benzenringen af monomerer. Kommercielt tilgængelige ionbytterharpikser er i form af små polymerperler, der skal lægges i blød i vand eller anden eluent før brug [1] . Kvældningen af ionbytterharpiksen er ledsaget af en stigning i tilgængeligheden af funktionelle grupper af polymeren på grund af udvidelsen af makromolekyler med eluentmolekyler, som i plastificeringen af polymeren. Graden af kvældning af ionbytterharpiksen styres af både længden af makromolekylerne og graden af tværbinding af polymermatrixen.
Ionbytterkromatografi gør det muligt at opdele molekylerne baseret på ioniske interaktioner . Den faste fase har ladede funktionelle grupper , der interagerer med de analyserede ioniserede molekyler af den modsatte ladning. Denne version af kromatografi er klassificeret i to typer - kationisk og anionisk ionbytterkromatografi:
Kromatofokusering (CF) er en ionbytningskromatografimetode baseret på eluering med en intern (skabt inde i søjlen) pH-gradient. I øjeblikket anvendes to teknikker til dannelse af pH-gradienter - "klassisk" kromatofokusering og induktion. CP bruges normalt til at adskille biologiske objekter - proteiner, peptider, aminosyrer, sjældnere azofarvestoffer og andre zwitterioniske forbindelser. I begyndelsen af 1990'erne foreslog P. N. Nesterenko og A. V. Ivanov en metode til koncentration og separation af overgangsmetaller på en enkelt søjle ved hjælp af kromatofokuseringsteknikken. Til disse formål dannes der traditionelt faldende pH-gradienter på anionbytningssorbenter.