Amplifikation (molekylærbiologi)

Amplifikation ( lat.  amplificatio  - amplifikation, stigning), i molekylærbiologi  - processen med dannelse af yderligere kopier af kromosomale DNA- sektioner , som regel indeholder visse gener eller segmenter af strukturelt heterochromatin . Amplifikation kan være en reaktion fra celler på en selektiv stimulus (for eksempel under påvirkning af methotrexat ). Amplifikation er en af ​​mekanismerne til aktivering af onkogener under tumorudvikling, for eksempel N-myc-onkogenet under udvikling af neuroblastom. Amplifikation er også akkumulering af kopier af en specifik nukleotidsekvens under PCR- polymerasekædereaktion [1] .

Fordoblingsprocessen

Det isolerede DNA-molekyle opvarmes, hvorefter det opdeles i to strenge. Tilføj primere . Blandingen af ​​DNA og primere afkøles derefter. I dette tilfælde binder primerne, hvis det ønskede gen er til stede i DNA-blandingen, til dets komplementære områder. Derefter tilsættes DNA-polymerase og nukleotider til blandingen af ​​DNA og primer . Indstil den optimale temperatur for DNA-polymerases funktion (37 °C). Under disse betingelser, i tilfælde af DNA-komplementaritet af genet og primeren , er nukleotider bundet til 3'-enderne af primerne, hvilket resulterer i syntesen af ​​to kopier af genet. Herefter gentages cyklussen igen, mens mængden af ​​DNA i genet fordobles hver gang. Reaktionen udføres i specielle apparater - forstærkere .

Noter

  1. Amplifikation (amplifikation) - Processen med dannelse af yderligere kopier af sektioner af kromosomalt DNA, som som regel indeholder visse gener eller segmenter af strukturel heterochr ... . Hentet 3. november 2011. Arkiveret fra originalen 6. januar 2011.