Såning ( bakposev ) er en af de stationære metoder til dyrkning af mikroorganismer på næringsmedier, der anvendes til kulturdiagnostik i medicinsk mikrobiologi, samt til undersøgelse af biokemiske og biologiske egenskaber til forskellige bioteknologiske formål. Afhængigt af indholdet af de undersøgte bakterier i prøven udføres podning på tætte næringsmedier (for at opnå isolerede kolonier og bestemme renheden af kulturen). Hvis indholdet af mikroorganismer i testmaterialet er ubetydeligt, så udføres podningen på flydende berigelsesmedie. Der findes forskellige metoder til såning [1] .
Særlige metoder er kendetegnet ved at tilføje en specifik komponent eller ændre basen.
Valgfrie metoder er karakteriseret ved kun at opnå vækst af mikroorganismen af interesse.
Tillad identifikation af individuelle typer, arter og grupper af bakterier.
Til afgrøder [2] bruges mikrobiologiske løkker , sjældnere nåle og spatler. Oftest bruges et reagensglas og en petriskål til dyrkning . Bakteriesløjfen er et universelt værktøj til såkultur . Ud over det bruges en speciel bakterienål til såning med en injektion, og metal- eller glasspatler bruges til såning på petriskåle . Til podning af flydende materialer anvendes sammen med løkken graduerede og Pasteur - pipetter.
Når de sår, tager de et reagensglas i venstre hånd, og med den højre, tæt om korken med den fjerde og femte finger, tager de det ud. Holder løkken med de andre fingre på samme hånd, først i vandret og derefter i lodret position, bringes den ind i åben ild og brændes til rød varme . Podestoffet opsamles med en afkølet løkke, hvorefter reagensglasset lukkes med en prop, efter at man forinden har holdt kanten af reagensglasset over flammen fra en spritlampe . Proppen skal ikke brændes. Derefter indføres en løkke med inokulum i reagensglasset med skrå agar, hvorved det sænkes til kondensatet i den nederste del af mediet, og materialet fordeles i en zigzag-bevægelse over den skrå overflade af agaren. Efter at have fjernet løkken, brændes kanten af reagensglasset og lukkes med en prop. Sløjfen flamberes i flammen fra en brænder og placeres i et stativ med håndtaget nede. Dyrkningsrør er underskrevet på forhånd med angivelse af podningsdato, undersøgelsens nummer og kulturens navn.
Afgrøder "plæne" produceret på et tæt næringsmedium i en petriskål. For at gøre dette, efter at have åbnet låget lidt med venstre hånd, påføres inokulumet med en løkke eller pipette på overfladen af næringsagaren i henhold til Drygalsky-metoden. Efter inkubationen af podningen fremkommer en ensartet kontinuerlig vækst af bakterier med deres opdeling i kolonier. Identifikation af isolerede bakteriekulturer udføres ved at studere bakteriers morfologi, deres kulturelle, biokemiske og andre egenskaber, der er iboende i hver art.
En koloni er en synlig isoleret ophobning af repræsentanter for en type mikroorganismer, dannet ved reproduktion af en kolonidannende enhed ( CFU ) på et fast næringsmedium (på overfladen eller i dets dybde). Kolonier af bakterier af forskellige arter adskiller sig fra hinanden i deres morfologi, farve og andre kulturelle karakteristika.
Kolonier [3] adskiller sig i størrelse, form, farve, konsistens, kantkontur, struktur og overfladekarakter:
I et flydende næringsmedium giver nogle bakteriekulturer diffus turbiditet, mens andre er kendetegnet ved nærbundet, parietal vækst. Nogle kulturer danner film på overfladen af mediet, andre danner et bundfald i bunden af røret.
Dyrkning af anaerober adskiller sig væsentligt fra dyrkning af aerober : da atmosfæren indeholder en betydelig mængde ilt , bruges specielle såningsteknikker, medier og en anaerostat til at fjerne det fra miljøet [3] .