Dufensee er en arkæologisk kultur fra den mesolitiske æra , som eksisterede i perioden omkring 7000 - 5800 år. f.Kr e. Navnet på kulturen blev givet i 1925 af historikeren fra Hamburg Gustav Schwantes på udgravningsstedet nær Dufensee -sumpen i Slesvig-Holsten . Kulturen eksisterede i det, der nu er de tyske delstater Slesvig-Holsten , Mecklenburg og til dels Brandenburg .
Denne kultur omfatter de ældste buer fundet i Tyskland ( Friesack , Havelland-distriktet, Brandenburg ). Desuden blev der fundet et stort antal (flere hundrede) knoglespydspidser i Hohen-Ficheln og Frisack samt en række andre genstande.
Dufensee-kulturen indgår i den nordiske kreds af mesolitiske kulturer, sammen med såsom Maglemose-kulturen , Komornice-kulturen osv.