Størrelsesudelukkelseskromatografi

Gelfiltrerings- eller størrelsesudelukkelseskromatografi (sigte, gelpermeation, gelfiltreringskromatografi) er en type kromatografi , hvor molekyler af stoffer adskilles i størrelse på grund af deres forskellige evne til at trænge ind i porerne i den stationære fase. I dette tilfælde er de største molekyler (med højere molekylvægt ), der er i stand til at trænge ind i det mindste antal porer i den stationære fase, de første til at forlade søjlen. Stoffer med små molekylstørrelser, som frit trænger ind i porerne, kommer sidst ud. I modsætning til adsorptionskromatografi forbliver den stationære fase under gelfiltrering kemisk inert og interagerer ikke med de stoffer, der skal adskilles.

Princip

En prøveopløsning indføres i kolonnen , hvis volumen er begrænsende for kvaliteten af ​​kromatografi. Til analytiske adskillelser bør den ikke overstige 0,1 % af CV (total kolonnevolumen), og til præparativ oprensning bør den ikke overstige 8-10 % af CV. Søjlen er pakket med pulver, hvis partikler eller granulat har porer med en vis diameter. Makromolekylære stoffer, der ikke indgår i porerne, passerer mellem granulerne, så deres retentionsvolumen er lig med søjlens volumen minus volumenet af den stationære fase (det såkaldte frie volumen ). De unddrages først. Mellemstore molekyler er placeret i porerne i sorbenten, men ikke helt. Derfor er deres retentionsvolumen lidt højere end det frie volumen. De er begejstrede for det andet. De mindste molekyler kommer frit ind i porerne sammen med opløsningsmiddelmolekyler. Derfor er deres retentionsvolumen i søjlen meget højere end det frie volumen og nærmer sig det totale volumen af ​​søjlen (dvs. 100 % CV). De er lysbare til det sidste.

Sorbenter

Gel er et heterogent system, hvor den mobile fase (normalt vand) altid er inde i porerne i en stationær eller fast fase, kaldet gelmatrixen.

Lavtryk

Højtryk